Celule CAR T create direct în corp elimină tumorile la șoareci

În mod ideal, celulele T, adevărații “ucigași” ai sistemului nostru imunitar adaptativ, ar trebui să poată elimina celulele canceroase. Totuși, în majoritatea cazurilor, acestea fie nu recunosc celulele tumorale ca fiind anormale, fie sunt suprimate de microambienții tumorali.

Terapia cu celule CAR T rezolvă această problemă prin ingineria genetică a celulelor T pentru a exprima un receptor artificial – mai exact, un receptor antigen chimic (CAR), care le „instruiește” să atace celulele canceroase ce exprimă o proteină țintă specifică (de exemplu, CD19 pe celulele leucemice). În prezent, șapte astfel de terapii sunt aprobate de FDA, reușind să inducă remisii durabile la pacienții cu cancere de sânge care nu aveau alte alternative.

Procesul standard implică prelevarea celulelor T de la pacient și transportul acestora la o facilitate specializată, unde un gen pentru CAR este introdus în celule folosind un vector retroviral sau lentiviral. Apoi, celulele sunt cultivate în laborator și reinfuzate în pacient. Această procedură durează între 3 și 5 săptămâni, costă sute de mii de dolari per tratament și oferă rezultate de calitate variabilă; adesea, celulele pur și simplu nu se multiplică eficient. Dincolo de problemele de cost, pacienții pot deceda în așteptarea tratamentului.

Într-un nou studiu publicat în revista Nature, o echipă de cercetători de la Universitatea din California, San Francisco, raportează renunțarea completă la procesul standard prin crearea celulelor CAR T in vivo. Un studiu din 2017 a demonstrat un sistem de tăiere precisă a ADN-ului bazat pe CRISPR, combinat cu un șablon pentru repararea ADN-ului, care poate fi folosit pentru a insera secvența CAR la o adresă specifică în genomul celulei T: locusul receptorului alfa constant al celulei T (TRAC). Inserarea genului CAR aici are mai multe avantaje importante, cum ar fi reglarea mai strictă a expresiei, ceea ce încetinește epuizarea celulei T. Până acum, acest sistem nu a fost utilizat in vivo.

Autorii au realizat această performanță folosind două sisteme de livrare. Prima parte a folosit vehicule de livrare învelite (EDVs), particule asemănătoare virusurilor, inginerate din proteine virale structurale. EDVs au livrat complexul de țintire și tăiere bazat pe CRISPR. Un alt sistem, bazat pe un virus adeno-asociat (AAV), a livrat gena CAR flancată de secvențe care se potrivesc regiunilor de pe ambele părți ale tăieturii CRISPR. Când mașinăria proprie de reparare a ADN-ului celulei repară ruptura indusă de CRISPR, aceasta utilizează șablonul livrat de AAV și, astfel, gena CAR este inserată precis la locusul TRAC.

După testarea conceptului in vitro, cercetătorii au implantat șoareci imunodeficienți cu un amestec de celule imune umane, inclusiv celule T, B și monocite (celule mononucleare din sânge periferic, PBMCs). Apoi, șoarecii au primit o injecție intravenoasă a combinației EDV + AAV care transporta CAR-CD19.

Două săptămâni mai târziu, splinele au fost colectate. Echipa a descoperit că celulele TRAC-CAR T erau prezente în splinele șoarecilor, demonstrând astfel succesul metodei lor inovative.

Sursa: Lifespan Life Extension